Криоконсервация наносит вред выживаемости и фертильности сперматозоидов из-за физического и химического стресса, оказываемого на клетки во время замораживания. Сперма жеребцов обладает низкой криоустойчивостью. Совершенствование протокола криоконсервации, включая состав разбавителя является актуальным. В данном исследовании проведен анализ использования двух разбавителей для центрифугирования и криоконсервации спермы жеребцов. Было проанализировано 27 эякулятов от 9 жеребцов. Анализ показал достоверное различия (Р<0,05) по оценке подвижности и числу клеток без повреждений после центрифугирования в разных разбавителях. Лучше оказался опытный разбавитель. Достоверных различий по количеству сперматозоидов с повреждениями хвоста, акросомы, ДНК и по уровню стимуляции дыхания 2,4 ДНФ не наблюдалось. Использование опытного разбавителя лучше сохраняло подвижность (Р<0,05), морфологию сперматозоидов (Р<0,01), акросомы (Р<0,05) и сопряженность дыхания и фосфорилирования (2,4 ДНФ тест) (Р<0,01) при выбранном протоколе криоконсервации спермы по сравнению с разбавителем ЛЦХЖ.
В современном животноводстве репродуктивные биотехнологии, такие как искусственное осеменение (ИО), играют ключевую роль в повышении продуктивности и улучшении генетического потенциала сельскохозяйственных животных. ИО позволяет не только максимально эффективно использовать генетический материал выдающихся производителей на большем количестве самок, но и снизить риск распространения инфекционных заболеваний, передающихся половым путем. Успех ИО во многом определяется качеством используемой спермы, которое зависит от методов обработки и хранения эякулята. Среди существующих методов селекции сперматозоидов, центрифугирование занимает одно из ведущих мест. Это метод основан на разделении компонентов эякулята под воздействием центробежной силы. В практике центрифугирования выделяют два основных подхода: стандартное и коллоидное центрифугирование. Стандартное центрифугирование представляет собой однократное разделение компонентов эякулята, при этом режим центрифугирования подбирается в соответствие видовым особенностями сперматозоидов: 200-400 об/мин в течение 5-12 мин для грызунов, 720 об/мин в течение 5 мин для собак, 2400 об/мин в течение 5 мин для жеребцов, 5000 об/мин в течение 5 мин для быков, 3000 об/мин в течение 3 мин для козлов, 2400 об/мин в течение 3 мин для кабанов Коллоидное центрифугирование предусматривает использование специальных коллоидных растворов (Percolltm, Isolate®, Porcicoll®, Bovicoll®, Equipure Bottom Layer®, PureSperm®) для более эффективного отделения сперматозоидов с наилучшими морфологическими и функциональными характеристиками. Коллоидное центрифугирование позволяет получить эякулят более высокого качества, поскольку с его помощью можно отделить не только семенную плазму, но и дефектные, малоподвижные сперматозоиды, а также клетки с поврежденной ДНК.